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PCR实验室净化系统设计要求

日期:2022-07-29 17:06:00发布人:本站浏览数:182
  PCR实验室又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精确度高达纳米级别。

  当前,PCR实验室广泛应用于医院及各疾病预防控制中心的疫病检验,2010年,卫生部办公厅制定并发布了《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》以及《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》(以下简称导则)。导则规定了PCR实验室设计的基本原则,原则上PCR实验室需设置4个区域∶试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区,各个分区具体设备配置也各有不同。



  PCR实验室设置的4个区域主要设备配置:

  试剂储存和准备区:冷冻冷藏冰箱、超净工作台、台式离心机、掌上离心机、微孔板离心机、可移动紫外灯、混匀器、田平、微量加样器等;

  标本制备区:2~8℃冰箱、低温冰箱或超低温冰箱、生物安全柜、高速离心机、均质仪、核酸提取仪、蒸汽灭菌器、超微量紫外分光光度计、过氧化氢消毒剂、金属浴、水浴箱等;

  扩增区:普通PCR仪、荧光定量PCR仪、数字PCR仪、质谱仪、微量加样器、低温冰箱、可移动紫外灯等;

  产物分析区:凝胶成像系统、电泳系统、微量加样器、可移动紫外灯等。

  PCR实验室四个区域要求:空气不能直接相通

  根据导则要求,PCR 实验室各个区域无论在空间上还是使用中必须完全独立,不能有任何空气的直接相通。空气流向可按照:试剂储存和准备区——标本制备区——扩增区——产物分析区压力递减的方式进行,防止各区域空气的交叉污染。

  PCR实验室设计核心:各区域压力梯度控制

  PCR 反应的最大特点就是极高的灵敏性,极其微量的污染就会造成 PCR 实验结果的假阳性,因此组合型 PCR 实验室设计的核心问题就是避免交叉污染,而组合型 PCR 实验室的平面布局模式及各区域的压力梯度控制成为了解决这一核心问题的关键。

  PCR实验室空调系统:严格控制送排风比例

  现行国家标准《疾病预防控制中心建筑技术规范》GB 50881 对 PCR 实验室的各项设计参数进行了规范与要求,PCR实验室各区域并没有净化控制要求,但为了避免交叉感染,通常采用全送全排的直流空调系统,并且需要严格控制好送风、排风的比例,保证各实验区域的压力梯度。

  PCR实验室暖通:独立的全新风

  组合型PCR实验室的空调负荷、换气次数等要求与二级生物安全实验室原则一致。PCR实验室的暖通空调系统需设置独立的一套全新风空调系统,PCR实验室并无空气净化的强制性要求,因此只需要设置初效加中效过滤器即可,不同房间的排风宜设置止回装置,排风机吸入侧设置活性炭等生物净化装置。

  PCR缓冲间:双向保护屏障

  组合型 PCR 实验室应设置缓冲间,缓冲间在实验核心区与专用走廊区域形成一道双向保护屏障,既阻止外部环境的潜在污染物质如气溶胶等进入实验核心区,同时又控制核心实验(产物分析)的有害物质渗入环境,对实验区外部环境及内部试剂均起到了保护作用。

  本文节选自《二级生物安全实验室设计建造与运行管理指南》


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